Пожалуйста, используйте этот идентификатор, чтобы цитировать или ссылаться на этот ресурс:
http://hdl.handle.net/20.500.12701/4365
Полная запись метаданных
Поле DC | Значение | Язык |
---|---|---|
dc.contributor.author | Варвашеня, Руслан Николаевич | ru |
dc.contributor.author | Прач, Анастасия Александровна | ru |
dc.contributor.author | Плотников, Евгений Владимирович | ru |
dc.contributor.author | Деев, Сергей Михайлович | ru |
dc.contributor.author | Белоусов, Михаил Валерьевич | ru |
dc.contributor.author | Ларькина, Мария Сергеевна | ru |
dc.contributor.author | Чернов, Владимир Иванович | ru |
dc.date.accessioned | 2024-12-13T08:04:28Z | - |
dc.date.available | 2024-12-13T08:04:28Z | - |
dc.date.issued | 2024 | |
dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/20.500.12701/4365 | - |
dc.description.abstract | Цель - изучить in vitro и in vivo функциональную пригодность лиофилизата таргетных каркасных белков с анкириновыми повторами DARPin G3-(GGGS)3Cys, меченых 99mTc, для радионуклидной визуализации гиперэкспрессии HER2/neu в злокачественных опухолях. Материалы и методы. Для наработки таргетного белка использовали модифицированную генетическую конструкцию с последовательностью, кодирующей белок DARPin G3-(GGGS)3Cys. Для получения экспериментального препарата использовали лиофилизат, содержащий DARPin G3-(GGGS)3Cys со вспомогательными веществами, и раствор натрия пертехнетата, 99mТс (500 МБк) при инкубации 60 °С, 30 мин. Анализ радиохимической чистоты (РХЧ) 99mTс-G3-(GGGS)3Cys проводили тонкослойной радиохроматографией. Для оценки специфичности in vitro использовали клеточные линии: SKOV-3 более BT-474 более DU-145. Константу диссоциации определяли с помощью анализа насыщения на SKOV-3 в диапазоне концентраций белка от 0,2 до 40 нМ. Для оценки таргетных свойств и биораспределения использовали мышей линии Nu/j, несущих ксенотрансплантаты SKOV-3 (HER2/neu позитивные) и ксенотрансплантаты Ramos (HER2/neu негативные). Результаты. Получен радиокомплекс на основе 99mTс и лиофилизата таргетных белков DARPin G3(GGGS)3Cys с РХЧ более 96%. Связывание 99mTс-G3-(GGGS)3Cys с клетками является специфичным c KD 3,9 ± 0,5 нМ и пропорционально уровню экспрессии HER2/neu в клетках. Поглощение 99mTс-G3-(GGGS)3Cys в ксенотрансплантатах SKOV-3 было значимо выше, чем в ксенотрансплантатах Ramos. 99mTсG3-(GGGS)3Cys продемонстрировал быстрое выведение из крови, почечный клиренс, низкие уровни активности в слюнных железах и желудке. Уровень накопления активности в печени составил около 5-7 %ВД/г. Кроме того, 99mTс-G3-(GGGS)3Cys имел очень низкое поглощение в легких, мышцах, тонком кишечнике и костях. Заключение. Лиофилизат таргетных каркасных белков DARPin G3-(GGGS)3Cys, меченый 99mTc, функционально пригоден для визуализации гиперэкспрессии HER2/neu в опухолях, поскольку специфически связывается с рецептором, стабилен in vivo и имеет благоприятное биораспределение в органах и тканях. Радиокомплекс 99mTс-G3-(GGGS)3Cys получен по простой процедуре с высокой радиохимической чистотой.Aim. To study in vitro and in vivo the functional suitability of 99mTc-labeled lyophilized formulation containing designed ankyrin repeat protein (DARPin) G3-(GGGS)3Cys for radionuclide imaging of HER2/neu overexpression in malignant tumors. Materials and methods. To create a targeted protein, a modified genetic construct with the sequence encoding DARPin G3-(GGGS)3Cys was used. To generate the experimental probe, we used a lyophilized formulation containing DARPin G3-(GGGS)3Cys with auxiliary substances and 99mTc sodium pertechnetate (500 MBq) incubated at 60 °C for 30 min. Radiochemical purity of 99mTc-G3-(GGGS)3Cys was analyzed by thin-layer radiochromatography. SKOV-3, BT-474, and DU-145 cell lines were used to test binding specificity in vitro. The dissociation constant was determined via a saturation binding assay on SKOV-3 cells with a range of protein concentrations from 0.2 to 40 nM. Nu/j mice bearing HER2-positive SKOV-3 xenografts and HER2-negative Ramos xenografts were used to evaluate the targeting properties and biodistribution. Results. A radiocomplex based on 99mTc and a lyophilized formulation with DARPin G3-(GGGS)3Cys was obtained with the radiochemical purity of more than 96%. Binding of 99mTc-G3-(GGGS)3Cys to the cells was specific (KD 3.9 ± 0.5 nM) and proportional to the level of HER2/neu expression in the cells. The uptake of 99mTc-G3-(GGGS)3Cys in SKOV-3 xenografts was significantly higher than in Ramos xenografts. 99mTc-G3-(GGGS)3Cys demonstrated rapid blood and renal clearance and had low activity in the salivary glands and stomach. Liver uptake was about 5-7%ID/g. In addition, 99mTc-G3-(GGGS)3Cys exhibited very low uptakes in the lungs, muscles, small intestine, and bones. Conclusion. The 99mTc-labeled lyophilized formulation with DARPin G3-(GGGS)3Cys is functionally suitable for imaging HER2/neu overexpression in tumors, as it binds specifically to the receptor, is stable in vivo, and has favorable biodistribution in organs and tissues. The radiocomplex based on 99mTc-G3-(GGGS)3Cys was obtained by a simple method with high radiochemical purity. | ru |
dc.format.mimetype | application/pdf | |
dc.language.iso | ru | en |
dc.relation.ispartof | . 2024. Бюллетень Сибирской медицины | ru |
dc.rights | Attribution-NonCommercial 4.0 International | en |
dc.rights | info:eu-repo/semantics/openAccess | |
dc.rights.uri | https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/ | |
dc.subject | злокачественные опухоли | ru |
dc.subject | радионуклидная диагностика | ru |
dc.subject | оксотехнеций | ru |
dc.subject | лиофилизат | ru |
dc.subject | Her2/neu | en |
dc.subject | DARPin G3 | en |
dc.subject | malignant tumors | en |
dc.subject | radionuclide diagnosis | en |
dc.subject | oxotechnetium | en |
dc.subject | lyophilized formulation | en |
dc.title | Оценка функциональной пригодности лиофилизата таргетных каркасных белков с анкириновыми повторами для радионуклидной визуализации гиперэкспрессии HER2/neu в злокачественных опухолях | ru |
dc.type | Article | en |
dc.type | info:eu-repo/semantics/article | |
dc.type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion | |
dcterms.audience | Researches | en |
dc.identifier.doi | 10.20538/1682-0363-2024-3-16-24 | |
local.filepath | bsm-2024-3-16-24.pdf | |
local.filepath | https://bulletin.tomsk.ru/jour/article/view/5733/3599 | |
local.filepath | https://doi.org/10.20538/1682-0363-2024-3-16-24 | |
local.filepath | https://www.elibrary.ru/item.asp?id=72751479 | |
local.localtype | Статья | ru |
dc.identifier.rsi | https://www.elibrary.ru/item.asp?id=72751479 | |
Располагается в коллекциях: | Бюллетень сибирской медицины |
Файлы этого ресурса:
Файл | Размер | Формат | |
---|---|---|---|
bsm-2024-3-16-24.pdf | 370,85 kB | Adobe PDF | Просмотреть/Открыть |
Лицензия на ресурс: Лицензия Creative Commons