Состояние антиоксидантной системы в митохондриях клеток кожи при росте экспериментальной меланомы В16/F10 на фоне хронической нейрогенной боли

Abstract

Цель - изучить состояние антиоксидантной системы в митохондриях клеток кожи при росте меланомы В16/F10 у мышей на фоне хронической нейрогенной боли. Материалы и методы. Работа выполнена на самках мышей линии С57ВL/6 (n = 28). Экспериментальные группы: интактная, контрольная - воспроизведение модели хронической нейрогенной боли, группа сравнения - стандартная подкожная перевивка меланомы В16/F10, основная группа - перевивка меланомы В16/F10 через 3 нед после создания модели хронической нейрогенной боли. Животных на 14-е сут роста меланомы В16/F10 декапитировали, иссекали кожу, выделяли митохондрии. Тест-системой для иммуноферментного анализа определяли уровень восстановленного глутатиона (GSH), окисленного глутатиона (GSSG) (Bio Source, США); глутатионпероксидазы-4 (ГПО-4) (Clod-Clon Corporation, CNDR); глутатионредуктазы (ГР) (Cusabio, CNDR); глутатион-S-трансферазы (ГТ) (Ivvundiagnostik, Германия); глутатионпероксидазы-1 (ГПО-1), супероксиддисмутазы-2 (СОД-2) (Ab Frontier, Южная Корея). Результаты. В митохондриях клеток кожи в контрольной группе установлено повышение содержания GSH в 1,3 раза; ГПО-1 - 2,9; ГПО-4 - 1,9; ГР - 2,8; СОД-2 в 2,4 раза относительно значений у интактных животных. В группе сравнения обнаружили принципиально противоположные изменения: снижение содержания ГПО-1 в 1,9 раза; ГПО-4 - 3,7; ГР - 3,9; СОД-2 в 3,8 раза и повышение уровня GSSG в 1,36 раза по сравнению со значениями у интактных животных. При росте меланомы на фоне хронической нейрогенной боли отмечено увеличение уровня GSH в 1,5 раза; ГПО-1 - 3,6; ГТ - 1,28; ГПО-4 - 1,6 и СОД-2 в 1,8 раза по сравнению со значениями в интактной группе животных. Заключение. При росте меланомы В16/F10 на фоне хронической нейрогенной боли происходит перестройка антиоксидантной системы митохондрий клеток кожи в сторону реализации «восстановительного стресса» под воздействием хронической боли, что может оказывать влияние на рост и развитие экспериментальной меланомы.Aim. To study the state of the antioxidant system in mitochondria of skin cells during B16/F10 melanoma growth in mice with chronic neurogenic pain. Materials and methods. The study included female С57ВL/6 mice (n = 28). Experimental groups included an intact group, a control group - chronic neurogenic pain model, a comparison group - standard subcutaneous transplantation of В16/F10 melanoma, and a main group - transplantation of В16/F10 melanoma 3 weeks after creation of a model of chronic neurogenic pain. Animals were decapitated on day 14 of the В16/F10 melanoma growth, the skin was excised and mitochondria were isolated. Standard ELISA test systems were used to determine the levels of reduced glutathione (GSH) and oxidized glutathione (GSSG) (Bio Source, USA); glutathione peroxidase-4 (GPx 4) (Clod-Clon Corporation, CNDR); glutathione reductase (GR) (Cusabio, CNDR); glutathione S-transferase (G-S-T) (Ivvundiagnostik, Germany); glutathione peroxidase-1 (GPx 1), and superoxide dismutase-2 (SOD-2) (Ab Frontier, South Korea). Results. Mitochondria of skin cells in controls showed an increase in the levels of GSH by 1.3 times, GPx 1 - by 2.9 times, GPx 4 - by 1.9 times, GR - by 2.8 times, and SOD-2 - by 2.4 times, compared to intact animals. Changes in the comparison group were opposite: GPx 1 decreased by 1.9 times, GPx 4 - by 3.7 times, GR - by 3.9 times, SOD-2 - by 3.8 times, and GSSG rose by 1.36 times compared to intact animals. The growth of melanoma with chronic neurogenic pain caused an increase in the levels of GSH by 1.5 times, GPx 1 - by 3.6 times, G-S-T - by 1.28 times, GPx 4 - by 1.6 times, and SOD-2 - by 1.8 times, compared to intact animals. Conclusions. The growth of В16/F10 melanoma together with chronic neurogenic pain restructures the antioxidant system of skin mitochondria towards generation of reductive stress under the influence of chronic pain, which can affect the growth and development of experimental melanoma.