Субпопуляции В-лимфоцитов у больных раком молочной железы в зависимости от статуса PD-L1

Abstract

Цель. Изучить, насколько функциональные потенции и степень зрелости В-лимфоцитов сопряжены со статусом экспрессии PD-L1 опухоли у больных раком молочной железы. Материалы и методы. В исследование вошли 37 пациентов с морфологически верифицированным диагнозом инвазивной карциномы молочной железы неспецифического типа (ИКНТ). Статус PD-L1 определялся иммуногистохимически тестом Ventana SP142 (Roche, США). С использованием методов мультиплексной проточной цитофлуориметрии и высокопроизводительного секвенирования микроокружения были определены субпопуляции В-лимфоцитов, их профиль экспрессии CD27 и PD1 с учетом статуса PD-L1 опухоли. Результаты. В микроокружении опухоли у пациентов независимо от статуса PD-L1 определяются экспрессионные сигнатуры пяти субпопуляций лимфоцитов. Однако у больных с позитивным статусом в микроокружении первичной опухоли уровни В-лимфоцитов и В-лимфоцитов с переключаемым классом Ig выше по сравнению с пациентами, имеющими негативный статус PD-L1. Оценка количества различных субпопуляций В-лимфоцитов методом проточной цитофлуориметрии показала, что у больных с PDL1-позитивным статусом опухоли в микроокружении преобладают PD-1-позитивные В-лимфоциты независимо от степени их зрелости. Заключение. Результаты исследования показывают преобладание зрелых коммитированных В-лимфоцитов и В-лимфоцитов памяти, способных к синтезу иммуноглобулинов разных классов и цитокинов, относящихся к спектру иммуновоспалительных реакций Th2 типа в микроокружении PD-L1-позитивных опухолей. Это может являться неблагоприятным признаком при планировании иммунотерапии анти-PD-L1 ингибиторами, поскольку с высокой вероятностью ее применение может активировать клетки микроокружения с проопухолевыми потенциями, что в конечном итоге будет способствовать прогрессии карцином.

Aim. To study the association between the functional potency and degree of maturity of B lymphocytes and PD-L1 expression in breast cancer patients. Materials and methods. The study included 37 patients with the morphologically verified diagnosis of invasive breast cancer of no special type (IBC NST). The PD-L1 status was determined immunohistochemically using the Ventana SP142 assay (Roche, USA). Using the multiplex flow cytometry-based assay and high-throughput sequencing of the tumor microenvironment, subpopulations of B lymphocytes and their CD27 and PD1 expression profiles were determined, taking into account the PD-L1 status. Results. In the tumor microenvironment, regardless of the PD-L1 status, expression signatures of five lymphocyte subpopulations were determined. However, in PD-L1-positive patients, the levels of B lymphocytes and immunoglobulin class-switched B lymphocytes were higher compared with PD-L1-negative patients. Evaluation of the number of different B lymphocyte subpopulations by flow cytometry showed that PD-1-positive B lymphocytes predominated in the tumor microenvironment in PD-L1-positive patients, regardless of the degree of lymphocyte maturity. Conclusion. The results of the study showed predominance of mature committed B lymphocytes and memory B lymphocytes capable of synthesizing immunoglobulins of different classes and Th2 cytokines involved in type 2 immune response in PD-L-positive tumor microenvironment. It suggests that immunotherapy with PD-L1 inhibitors is highly likely to activate cells with protumor potential and can ultimately contribute to breast cancer progression.