Ранние маркеры фенотипической гетерогенности системной красной волчанки в экспериментальной модели

Abstract

Цель работы - выявление на основе индуцируемой воспалительной реакции у интактных мышей предрасположенности к дальнейшему развитию разных клинических вариантов системной красной волчанки. Материал и методы. Низкодозовый системный воспалительный ответ моделировали введением липополисахарида (ЛПС) интактным самкам мышей-гибридов (C57BL/6xDBA/2)F1 (B6D2F1) внутрибрюшинно в дозе 10нг/мышь или 1мкг/мышь. Динамику ответа на ЛПС оценивали через 2, 4, 8, 11, 24ч, а также на 4- и 8-й нед от момента индукции модели по числу форменных элементов крови (лейкоцитов, нейтрофилов, лимфоцитов), а также соотношению нейтрофилы/лимфоциты (индекс N/L), уровню внеклеточной ДНК (внДНК). Через 1 сут после введения ЛПС у мышей индуцировали модель системной красной волчанки (СКВ): самкам мышей B6D2F1 вводили по 120*10 в степени 6 клеток селезенки мышей родительской линии DBA/2. Через 3 мес от момента индукции модели у мышей двукратно измеряли уровень белка в моче: при протеинурии 3мг/мл и более мышей относили к группе CКВнефрит+, при наличии белка в моче менее 3мг/мл - к группе CКВнефрит-. Результаты. Установлено, что введение ЛПС не влияет на соотношение групп CКВнефрит+/CКВнефрит-. Ретроспективный анализ количества лейкоцитов, нейтрофилов, лимфоцитов не позволяет прогнозировать развитие нефрита. При введении ЛПС в дозе 10нг/мышь наблюдалось достоверное увеличение частоты и абсолютного прироста индекса N/L на 8-й нед относительно 4-й нед после индукции модели в группе CКВнефрит+ по сравнению с группой CКВнефрит-. При введении ЛПС в дозе 1мкг/мышь мыши CКВнефрит+ и CКВнефрит- обнаруживают разную динамику воспалительного ответа по приросту индекса N/L в каждой последующей точке относительно предыдущей. Изменение уровня внДНК в группе CКВнефрит+ и CКВнефрит- аналогично динамике индекса N/L. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о возможности использования параметров воспалительного процесса, в частности индекса N/L и уровня внДНК, для прогноза предрасположенности животного к развитию разных вариантов СКВ.A / 2 parent mice twice.

The study aimed at evaluating the predisposition for development of different variants of SLE based on an inflammatory response in intact mice. Materials and methods. Low-dose systemic inflammatory response was modeled by the administration of lipopolysaccharide (LPS) of E. coli (strain 111: B4) by intact B6D2F1 recipients in the dose of 10 ng/mouse or 1 μg / mouse. We evaluated the number of leukocytes, neutrophils, and lymphocytes in the blood, the index of neutrophils / lymphocytes (ratio N/L), and the level of free DNA (cf DNA cell free) in dynamics. The first day after LPS injection we induced SLE model: the female B6D2F1 mice were injected 60–70 x 106 spleen cells of the DBA / 2 parent mice twice with interval five days. Three months after the induction of the model, the level of protein in the urine was measured twice: the mice with proteinuria 3 mg/ml and more were assigned to the group SLEnephritis+, and mice with less than 3 mg/ml of protein in the urine were assigned to the group SLEnephritis–. Results. It was established that administration of LPS does not change the frequency of nephritis in mice. The retrospective analysis of the number of leukocytes, neutrophils, and lymphocytes does not allow the prediction of the development of nephritis. We observed a significant increase in the frequency and the absolute value of the N/L index at week 8 relative to 4 weeks four weeks before the appearance of proteinuria in the group of mice SLEnephritis+ in contrast to mice SLEnephritis– when LPS was administered at a dose of 10 ng/mouse. Mice SLEnephritis+ and SLEnephritis– show different kinetics of the inflammatory response by an increase in the N/L index every subsequent hour relative to the previous one when LPS was administered at a dose of 1 μg/mouse. The dynamics of the cfDNA level is similar to the kinetics of an index N/L in the group SLEnephritis+ and the SLEnephritis–. The data obtained indicate the possibility of using of the index N/L and cfDNA level as a parameter of inflammatory response in mice and prediction of the susceptibility the development of nephritis.